pET-22b(+) Seamless Cloning Kit（線性化質(zhì)粒）

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號
pET-22b(+) Seamless Cloning Kit（線性化質(zhì)粒）	20 μl	BJ-PJ6546

商品介紹：

保存條件：-20℃保存
產(chǎn)品介紹：
pET-22b(+)載體為高水平的原核表達載體，在N端含有PelB信號肽序列，能夠將表達的目的蛋白定位在細胞外周質(zhì)腔，同時在C端具有His標簽。本產(chǎn)品提供pET-22b(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體，可用無縫克隆技術將單個或多個DNA片段組裝到載體上。
無縫克隆技術可在重組酶的作用下，只需一步反應，便可將片段克隆到任何載體中的任意位置，得到重組質(zhì)粒。無縫克隆技術作為一種非常強大的克隆技術，具有快速、 簡便、高效、多片段組裝和定向克隆等特點，用于單個 DNA 片段的克隆，多個 DNA 片段組裝克隆以及多位點突變構建等實驗目的。
產(chǎn)品特點：
1. pET-22b(+)載體為原核表達載體，具有N-PelB signal seqence和C-His標簽。
2. pET-22b(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體，省時省力。
3. 無縫克隆技術只需要簡單的 PCR 擴增就可以制備片段DNA。
4. 可以克隆長片段和多片段DNA。
5. 簡單、快速、精確、定向克隆。
操作步驟：
1. pET-22b(+)線性化載體使用方法：
(1) pET-22b(+)線性化載體當做克隆載體使用，可以在擴增PCR產(chǎn)物的
上游引物 5’端添加序列：CGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCATG
下游引物 5’端添加序列：CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG
通過無縫克隆連接到pET-22b(+)中。
(2) 測序引物
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
(3) pET-22b(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的線性化載體，圖譜及多克隆位點見下圖。